Plateforme de test d'endotoxines bactériennes (TEB) Eclipse de Sievers
Une technologie TEB révolutionnaire qui assure automatisation et conformité
The innovative Sievers Eclipse automated endotoxin detection platform decreases assay setup time by up to 85% and reduces Limulus Amebocyte Lysate (LAL) reagent use by up to 90% while meeting all requirements of the harmonized pharmacopeia: USP <85>, EP 2.6.14 and JP 4.01. Through groundbreaking technology, the Eclipse endotoxin testing solution significantly decreases pipetting steps, reduces operator-to-operator variability, and simplifies BET test setup. La plateforme Eclipse utilise la manipulation précise des liquides microfluidiques et de l'endotoxique intégrée pour automatiser les procédures de tests cinétiques chromogéniques. Le débit de 21 échantillons par plaque est maintenu sans la complexité de la robotique ou les contraintes temporelles et techniques d'une procédure de test LAL traditionnelle.
Équipement et services de test d’endotoxines bactériennes conformes, cohérents et réfléchis
Chez Veolia, nous sommes convaincus de la nécessité de simplifier les mesures complexes.
Pendant des années, les tests d'endotoxines ont nécessité des techniciens parfaitement formés capables de préparer avec le plus grand soin des échantillons et des normes pour les dosages par gélification et plaque 96 puits. Ces approches analytiques prennent du temps à préparer, sont sujettes aux erreurs et aux nouvelles analyses, et ne répondent pas aux directives les plus récentes en matière d'intégrité des données. Bien que ces méthodes bénéficient de la sensibilité et de la spécificité du lysat d'amibocytes de limule (LAL) pour la détection des endotoxines, il existe une volonté de réduire l’utilisation des réactifs LAL. Cela est dû au fait que le LAL est créé à partir du sang de limule et nous voulons tous conserver et optimiser l’utilisation de cette ressource autant que possible.
Désormais, il existe une façon plus simple de mettre en place des tests d'endotoxines conformes tout en améliorant la durabilité grâce à un nouveau dosage officinal des endotoxines utilisant la microfluidique. Cette méthode simplifie la mise en place du test, diminue le nombre de nouvelles analyses, satisfait pleinement aux directives les plus récentes en matière d'intégrité des données, et réduit l'usage du LAL jusqu'à 90 %.
Le système d'analyse des endotoxines Eclipse de Sievers
Fonctionnalités et avantages
Caractéristiques du système
Options et accessoires
Ressources
Foire aux questions (FAQ) concernant les tests d’endotoxines bactériennes
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Qu’est-ce que le test d’endotoxines bactériennes ?
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Le test des endotoxines bactériennes consiste en une procédure essentielle de contrôle de la qualité utilisée dans les industries pharmaceutiques, les dispositifs médicaux et la biotechnologie dans le but de détecter et de quantifier la présence d’endotoxines dans divers produits. Les endotoxines sont des composants de la membrane cellulaire externe des bactéries à Gram négatif et peuvent provoquer de graves réponses immunitaires chez les humains et les animaux, même en petites quantités.
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Que sont les endotoxines bactériennes ?
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Les endotoxines bactériennes se trouvent dans la membrane externe da la paroi cellulaire des bactéries à Gram négatif. L’effet de l’endotoxine des bactéries à Gram négatif est principalement dû au composant lipidique A des lipopolysaccharides (LPS), qui peut exercer des réponses pyrogéniques (qui provoquent de la fièvre) éventuellement dangereuses. Les conséquences peuvent même être mortelles lorsque le composant se retrouve dans la circulation sanguine et autres fluides corporels au-delà d'une certaine quantité. Certains produits pharmaceutiques et appareils médicaux pouvant pénétrer dans la circulation sanguine, des tests d'endotoxines sont requis dans ces industries. En raison de sa toxicité élevée et de ses effets sur la sécurité des patients, l'endotoxine est régulée par la FDA aux Etats-Unis ainsi que par la pharmacopée internationale pour tous les produits des sciences de la vie pouvant entrer en contact avec le sang humain et/ou animal.
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Pourquoi faire des tests de recherche des endotoxines bactériennes dans l'eau ou les produits finis ?
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Dans les domaines pharmaceutiques et des appareils médicaux, ainsi que dans les industries des sciences de la vie, les tests de recherche d'endotoxines sont cruciaux pour la sécurité des patients et le contrôle de la qualité. Les tests de recherche d’endotoxines sont effectués sur les systèmes d’eau de qualité pharmaceutique, y compris l’eau pour injection (WFI) utilisée comme eau de fabrication, et les produits finis tels que les médicaments, les médicaments vétérinaires, les produits biologiques et les dispositifs médicaux. Les produits pharmaceutiques et médicaux testés incluent les médicaments à usage parentéral (administrés par injection par voie intraveineuse, sous-cutanée, intramusculaire et intradermique, par exemple), et les appareils médicaux en contact direct ou indirect avec le sang, le système cardiovasculaire, le système lymphatique, ou le fluide cérébrospinal. La pharmacopée internationale (USP <85>, PE 2.6.14 et JP 4.01) définit les exigences applicables aux Tests d'Endotoxine Bactérienne (TEB) et aux seuils autorisés. La FDA émet des recommandations pour les fabricants de produits biologiques, de médicaments et d'appareils médicaux sur le raisonnement actuel concernant les directives de test et les critères d'acceptation couverts par les procédures officinales.
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Comment fonctionne la méthode de test des endotoxines bactériennes ?
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Depuis près de 40 ans, la FDA américaine accepte le test de lysat d'amébocyte de limule (LAL) comme test de recherche d'endotoxine sur les produits finis. Ce test remplace celui d'apyrogénicité sur les lapins et constitue un test in vitro pouvant détecter la présence et la concentration des endotoxines bactériennes. Dans les tests LAL, le lysat de limules (Limulus Polyphemus) réagit aux endotoxines bactériennes pour indiquer la présence d'endotoxines dans un échantillon. Il existe trois grandes méthodologies de test d'endotoxines bactériennes pour les tests LAL : par gélification, par turbidimétrie et par chromogénie. Dans la méthode par gélification, le LAL et l'échantillon sont mélangés, puis analysés pour la formation du gel dans le tube de réaction. Les résultats découlent d'une interprétation subjective de la formation du caillot, et la méthode par gélification constitue donc un test qualitatif. Dans les méthodes par turbidimétrie et chromogénie, les échantillons sont mélangés avec le réactif LAL, et le changement de couleur ou la turbidité sont mesurés sur la durée. Les tests chromogéniques et turbidimétriques sont quantitatifs et démontrent la quantité d'endotoxines présente. Les résultats sont calculés à partir d'une courbe standard. Endotoxin limits and requirements for conducting BET are described in global pharmacopeia, USP <85>, EP 2.6.14 and JP 4.01. Un nouveau chapitre général dans la Pharmacopée européenne décrit une méthode TEB utilisant un facteur C recombinant (rFC) au lieu de la méthode classique à base de LAL.
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Quelle est la quantité de réactif LAL utilisée sur la plateforme TEB de Sievers Eclipse ?
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1 mL de réactif LAL permettent de traiter 21 échantillons sur la plateforme Eclipse. En diminuant l’utilisation de lysat de limulidae (HSC) jusqu’à 90 %, l’Eclipse réduit la demande de cette ressource naturelle précieuse et fournit un test TEB entièrement conforme que la population HSC mondiale peut maintenir.
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La plateforme TEB de Sievers Eclipse est-elle conforme ?
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Yes. The Eclipse platform uses commercially available, FDA-licensed LAL and meets all requirements of the harmonized global pharmacopoeia, USP <85>, EP 2.6.14, and JP 4.01. Bacterial endotoxin testing with the Eclipse platform includes minimum three-point standard curve in duplicate using standardized endotoxin; samples and PPCs in duplicate; negative controls in duplicate; analyst and lysate lot qualification in triplicate; use of FDA licensed LAL. Ces tests sont également conformes à la norme 21 CFR Part 11 et aux directives sur l'intégrité des données.
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Les courbes standard sont-elles automatisées à l'aide de Sievers Eclipse ?
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Oui. De façon traditionnelle, pour obtenir des tests d'endotoxines conformes, l'utilisateur final doit élaborer une courbe standard d'au moins trois points en double à partir d'un flacon d'endotoxine normalisée ; doit disposer de contrôles négatifs en double ; et doit exécuter chaque échantillon en double avec un PPC, également en double. Avec la plateforme TEB Sievers Eclipse, ces étapes sont automatisées à l'aide de normes d'endotoxines préchargées pouvant aller jusqu'à des courbes standard de cinq points et des PPC préchargés. Par conséquent, il suffit à l'utilisateur final de charger de l'eau pour le TEB et les échantillons sur la plaque. Aucune préparation supplémentaire n'est requise. Il est donc possible de configurer le test en 9 minutes, alors que les autres plateformes peuvent nécessiter jusqu'à 60 minutes.